Замороженная пуповинная кровь - лучший источник гемопоэтических стволовых клеток для получения NK-клеток in vitro

Адоптивная терапия естественными киллерами (NK-клетками) основана на получении большого количества этих цитотоксичных клеток. Дифференцировка NK-клеток из гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) in vitro становится привлекательной возможностью для такой терапии. Пуповинная кровь и периферическая кровь после мобилизации являются наиболее доступными источниками ГСК, так как процедуры их получения малоинвазивны. В этом исследовании авторы сравнили способности замороженных и свежевыделенных гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови и замороженных ГСК периферической крови генерировать NK-клетки in vitro. 

Модифицировав ранее опубликованный протокол, ученые показали, что культура замороженных ГСК пуповинной крови давала большее количество NK-клеток без потери функций по сравнению с культурами свежих ГСК пуповинной крови. NK-клетки из ГСК пуповинной крови и периферической крови экспрессировали низкие уровни KIR рецепоторов (killer-cell immunoglobulin-like receptors), но высокие уровни активирующих рецепторов и миелоидного маркера CD33. Однако исследования с блокированием показали, что экспрессия CD33 не влияет на функции полученных клеток. 

Естественные киллеры, полученные из ГСК пуповинной крови, демонстрировали повышенную способность секретировать интерферон-γ (interferon-γ, IFN-γ) и уничтожать K562 клетки in vitro и in vivo по сравнению с клетками, полученными из ГСК периферической крови. Более того, уничтожение клеток-мишеней NK-клетками могло быть улучшено путем стимуляции интерлейкином-12 (interleukin-12, IL-12). 

Полученные данные указывают на то, что использование ГСК пуповинной крови после криоконсервации для получения NK-клеток in vitro приводит к генерации большего количества клеток, чем применение ГСК периферической крови. Представленные результаты обеспечивают оптимальную стратегию получения NK-клеток in vitro для иммунотерапии, при этом полученные клетки демонстрируют более выраженные эффекторные свойства по сравнению с NK-клетками из других источников ГСК.

Литература

Luevano M, Domogala A, Blundell M, Jackson N, Pedroza-Pacheco I, Derniame S, Escobedo-Cousin M, Querol S, Thrasher A, Madrigal A, Saudemont A. Frozen cord blood hematopoietic stem cells differentiate into higher numbers of functional natural killer cells in vitro than mobilized hematopoietic stem cells or freshly isolated cord blood hematopoietic stem cells. PLoS One. 2014 Jan 29;9(1):e87086.

Полный текст статьи