Гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) в совместных культурах со стромальными клетками линии UG26-1B6 или при культивировании с добавлением их кондиционированной среды способны длительное время характерные свойства. Авторы этой работы с помощью полногеномного исследования изучили изменения экспрессии генов стромальных клеток UG26-1B6 в ответ на контакт с мышиными Lineage- SCA-1+ KIT+ (LSK) клетками, среди которых много гемопоэтических стволовых клеток.
Проведенный анализ показал, что экспрессия фактора роста соединительной ткани (connective tissue growth factor, CTGF) усиливается в ответ на воздействие LSK клетками. Авторы обнаружили, что ко-культивирование ГСК со стромальным клетками, в которых активность гена CTGF заблокирована (shCtgf клетки), приводит к нарушению приживления гемопоэтических стволовых клеток при трансплантации и потере качества этих клеток при длительном культивировании. Дальнейшие эксперименты показали, что большое количество CD34- CD48- CD150+ LSK (CD34- SLAM) клеток, популяция которых наиболее обогащена гемопоэтическими стволовыми клеткми, в таких совместных культурах находились в G0 фазе клеточного цикла, подвергались старению и демонстрировали увеличение времени до первого клеточного деления.
Для того, чтобы понять это наблюдение, была создана модель сигнальной сети CTGF, которая была подтверждена экспериментально. В экспериментах с совместным культивированием CD34- SLAM со стромальными shCtgf клетками (окаутными по гену CTGF) была обнаружена активация SMAD2/3-опосредованной сигнализации с увеличением экспрессии p27Kip1 и подавлением циклина D1.
Полученные данные свидетельствуют о том, что Lineage- SCA-1+ KIT+ гемопоэтические клетки изменяют экспрессию генов в клетках гемопоэтической ниши, что ведет к поддержанию репопулирующей активности ГСК (т.е. способности к восстановлению кроветворения у реципиента).
Литература
Проведенный анализ показал, что экспрессия фактора роста соединительной ткани (connective tissue growth factor, CTGF) усиливается в ответ на воздействие LSK клетками. Авторы обнаружили, что ко-культивирование ГСК со стромальным клетками, в которых активность гена CTGF заблокирована (shCtgf клетки), приводит к нарушению приживления гемопоэтических стволовых клеток при трансплантации и потере качества этих клеток при длительном культивировании. Дальнейшие эксперименты показали, что большое количество CD34- CD48- CD150+ LSK (CD34- SLAM) клеток, популяция которых наиболее обогащена гемопоэтическими стволовыми клеткми, в таких совместных культурах находились в G0 фазе клеточного цикла, подвергались старению и демонстрировали увеличение времени до первого клеточного деления.
 |
| Взаимодействие мышиных гемопоэтических стволовых клеток и стромальных клеток in vitro |
Для того, чтобы понять это наблюдение, была создана модель сигнальной сети CTGF, которая была подтверждена экспериментально. В экспериментах с совместным культивированием CD34- SLAM со стромальными shCtgf клетками (окаутными по гену CTGF) была обнаружена активация SMAD2/3-опосредованной сигнализации с увеличением экспрессии p27Kip1 и подавлением циклина D1.
Полученные данные свидетельствуют о том, что Lineage- SCA-1+ KIT+ гемопоэтические клетки изменяют экспрессию генов в клетках гемопоэтической ниши, что ведет к поддержанию репопулирующей активности ГСК (т.е. способности к восстановлению кроветворения у реципиента).
Литература
Istvánffy R., Vilne B., Schreck C., Ruf F., Pagel C., Grziwok S., Henkel L., Prazeres da Costa O., Berndt J., Stümpflen V., Götze K.S., Schiemann M., Peschel C., Mewes H.W., Oostendorp R.A. Stroma-Derived Connective Tissue Growth Factor Maintains Cell Cycle Progression and Repopulation Activity of Hematopoietic Stem Cells In Vitro. Stem Cell Reports. 2015 Oct 28. pii: S2213-6711(15)00280-5. doi: 10.1016/j.stemcr.2015.09.018. [Epub ahead of print]
Комментариев нет:
Отправить комментарий