Ученые получили функциональные антиген-специфические человеческие CD8+ Т-лимфоциты из стволовых клеток пуповинной крови, используя экзогенную сигнализацию Notch и тетрамеры HLA.
Ранее исследователи продемонстрировали in vitro дифференцировку мышиных и человеческих стволовых клеток в ранние Т-лимфоциты, используя искусственные системы Notch сигнализации. Однако создание зрелых, функциональных, антиген-специфичных Т-клеток напрямую из человеческих стволовых клеток оставалось неразрешимой задачей, за исключением методик, при которых ГСК ко-культивируют со стромальными клетками или трансфецируют ретровирусным вектором, несущим последовательность, которая кодирует антиген-специфический Т-клеточный рецептор.
Ранее исследователи продемонстрировали in vitro дифференцировку мышиных и человеческих стволовых клеток в ранние Т-лимфоциты, используя искусственные системы Notch сигнализации. Однако создание зрелых, функциональных, антиген-специфичных Т-клеток напрямую из человеческих стволовых клеток оставалось неразрешимой задачей, за исключением методик, при которых ГСК ко-культивируют со стромальными клетками или трансфецируют ретровирусным вектором, несущим последовательность, которая кодирует антиген-специфический Т-клеточный рецептор.
В данной работе авторы показали, что человеческие CD34+CD38-/low гемопоэтические стволовые клетки (ГСК), выделенные из пуповинной крови, могут быть успешно дифференцированы в функциональные, антиген-специфичные цитотоксические CD8+ Т-лимфоциты без непосредственного ко-культивирования со стромальными клетками или без ретровирусной трансфекции генами Т-клеточных рецепторов. Поверхностно иммобилизованные лиганды Notch (DLL1) и кондиционированная среда стромальных клеток эффективно индуцирует развитие CD1a+CD7+ и CD4+CD8+ ранних Т-лимфоцитов. При дальнейшем культивировании с тетрамерами HLA-A*0201, нагруженными эпитопами цитомегаловируса или вируса гриппа А, эти клетки дают начало поликлональной популяции CD8+ Т-лимфоцитов, специфичных против цитомегаловируса или против вируса гриппа А соответственно. При дальнейшей активации с помощью нагруженных антигеном клеток-мишеней, Т-лимфоциты, полученные из человеческих стволовых клеток, проявляют цитолитическую активность, в частности - поверхностную мобилизацию CD107a, продукцию IFNγ и гранзима B.
Антиген-специфичные Т-лимфоциты, полученные из человеческих гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови in vitro, могут в конечном счете стать источником клеток для адоптивной иммунотерапии, а также позволят лучше понять развитие человеческих Т-клеток.
Литература
Fernandez I, Ooi TP, Roy K. Generation of Functional, Antigen-Specific CD8+ Human T Cells from Cord-Blood Stem Cells using ExogenousNotch and Tetramer-TcR Signaling. Stem Cells. 2013 Aug 13. doi: 10.1002/stem.1512. [Epub ahead of print]
Комментариев нет:
Отправить комментарий