Качество гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови после длительной криоконсервации

Трансплантация криоконсервированной пуповинной крови может быть использована для лечения большого количества гематологических и иммунологических заболеваний. В этом исследовании мы изучили качество пуповинной крови, криоконсервированной на 2 года (группа I), 4 года (группа II) и 6 лет (группа III).

Были использованы следующие параметры и процедуры для тестирования отдельных образцов криоконсервированной пуповиной крови: определение общего количества ядросодержащих клеток (ЯСК), жизнеспособность клеток, определение CFU-GM методом колониеобразования, активация Т-клеток in vitro и приживление гемопоэтических стволовых клеток NOD/SCID мышам in vivo.

Выход ЯСК в группах I, II и III был равен 106,2± 6,17%, 96,69 ± 6,39% и 100,38 ± 5,27% соответственно, а средний процент жизнеспособных клеток после размораживания составил 86,88%, 86,38% и 87,43%. При постановке теста на образование колоний (начальная плотность ЯСК 5×10³ клеток на чашку Петри) количество CFU-GM было равно 3,6 в группе I, 13,8 в группе II, 14,2 в группе III и 14,7 для свежей пуповинной крови. 

Исследователи подтвердили, что человеческие CD4+ и CD8+ Т-лимфоциты в криоконсервированной пуповинной крови являются функционально активными, что было оценено с помощью активированных человеческих CD25+ клеток. Более того, процент человеческих CD45+ клеток в костном мозге NOD/SCID мышей после инфузии изолированных человеческих CD34+ клеток составил 4,32 ± 1,29% (группа I), 4,48 ± 1,11% (группа II), 4,40% ± 1,12% (группа III) и 4,50% ± 0,66% (свежая пуповинная кровь). Процент человеческих CD45+ клеток в периферической крови мышей был равен 14,69 ± 3,08% (группа I), 15,24 ± 4,05% (группа II), 15,74 ± 3,43% (группа III) и 17,48 ± 3,74% (свежая пуповинная кровь).

Литература

Eom JE, Kim DS, Lee MW, Yu DK, Jin KS, Shin S, Lee SH, Sung KW, Koo HH, Yoo KH. Quality of functional haematopoietic stem/progenitor cells from cryopreserved human umbilical cord blood. Vox Sang. 2014 Feb 12. doi: 10.1111/vox.12132. [Epub ahead of print]

Абстракт